세로디아 에이취 아이 브이-1/2(Serodia HIV-1/2) - 의약품 상세정보

1) 혈장과 혈청을 검체로 사용한다.

2) 채혈 후 혈액을 원심분리하여 응고 성분 등의 고형물은 제거하고 상층액의 혈장 또는 혈청을 사용한다.

3) 신선한 검체를 사용하는 것이 좋으나, 냉장 보관시 7일 이내 사용가능 하다.

1) 동결 건조된 감작입자의 각각의 용기에 표시된 용량만큼씩 용해용액을 넣어 용해시킨다.

(1) HIV-1 감작입자 (불활화 처리된 HIV-1항원 감작 1% 젤라틴 입자)의 표시량 : 0.6mL, 1.5mL

(2) HIV-2 감작입자 (불활화 처리된 HIV-2 항원 감작 1% 젤라틴입자)의 표시량 : 0.6mL, 1.5mL

(3) 미감작입자(탄닌산처리된 젤라틴입자)의 표시량 : 1.0mL, 2.0mL

※ 용해용액량에 따른 동결건조된 감자입자 용해액 표시량

1) 동결건조시약은 용해용액으로 용해 후 당일사용을 원칙으로 하나, 2~10℃ 에 보관 할 경우, 7일간 사용가능하다.

1) 동결 건조 된 감작입자 및 미감작입자는 용해용액으로 녹여 30분전에 실온(15-30℃)에 방치 합니다.

2) 마이크로파이펫(Micropipette)으로 검체희석용액을 마이크로플레이트(Microplate)의 첫 번째 웰에 75㎕, 두 번째, 세번째, 네 번째 웰에 25㎕씩 넣는다.

3) 마이크로파이펫(Micropipette)으로 희석용액이 들어 있는 첫 번째 웰에 검체 25㎕를 가한 후 파이펫의 플런저를 3~4회 왕복하여 혼합한다. 혼합된 첫 번째 웰에서 25㎕를 취하여 두 번째웰에 옮겨 잘 혼합하여 희석하고 다음시험관에서 마지막 네 번째 웰까지 반복한다(2^N 희석).

4) 마지막 네 번째 웰에서 희석검체 25㎕를 파이펫으로 버린다.

5) 드로퍼(Dropper)를 이용하여 두 번째 웰은 미감작입자 1방울(25㎕)을 넣으며(1:16 희석), 세 번째 웰은 HIV-1감작입자 1방울(25㎕)을(1:32 희석), 네 번째 웰에 HIV-2 감작입자 1방울(25㎕)을 첨가한다(1:64 희석)

※ HIV-1 감작입자와 HIV-2 감작입자를 섞이지 않도록 주의하며, 감작입자와 미감작입자를 마이크로웰에 넣은후 즉시 내용물을 혼합한다.

6) 트레이 믹서(Tray Mixer) 등을 이용하여 잘 혼합한다. 만약 믹서를 사용하지 않고 매뉴얼로 혼합할 경우 플레이트 끝부분을 몇 번씩 쳐서 충분하게 혼합한다.

7) 플레이트 뚜껑을 덮고 실온에 수평으로 2시간 동안 방치한 후 판독한다.

※ 방치하는 동안 마이크로플레이트의 뚜껑을 덮고 진동을 피해 인큐베이션 한다.

표1. 시험법 요약

1) 마이크로플레이트를 조심스럽게 판정용 트레이 뷰어(tray viewer)나 밝은 흰 표면위로 옮긴 후 대조시험의 미감작입자의 응집패턴들과 비교하면서 입자의 반응상을 판독한다.

(1) 음성

① - : 입자가 단추모양으로 웰 중심부에 모이고 링주변이 균등한 원형을 보인다.

(2) 양성

① + : 입자가 링모양으로 분명하고 크며, 그 주변이 불균등하게 응집을 보인다.

② ++ : 응집 입자들이 균일하게 일어나면서, 전체적으로 막상을 보이며 넓다.

(3) 재시험

① ± (미결정) : 입자가 작은 링을 형성하고 링주변이 균등한 원형을 보인다.

시험결과가 약양성(±)의 결과를 보이면 동일한 방법으로 재시험을 하여 판정하여야 한다. 단 재시험 후 동일한 결과(약 양성, ±)를 나타내면 이 키트와 다른 방법들로 검사를 통하여 확인한다.

② 검체와 미감작입자가 응집을 일으키는 경우

아래와 같은 시험을 수행 한후에 재시험을 수행하여야 한다.

가) 용해시킨 미감작입자액 350㎕를 시험관에 넣는다.

나) 희석배수가 1:8이 되도록 미감작입자와 반응한 검체(혈청) 50㎕를 시험관에 넣어 잘 혼합한 후 실온(15-30℃)에서 20분간 방치한다.

다) 2,000rpm에서 5분간 원심분리한다. 분리된 상층액 50㎕를 조심스럽게 취하여 마이크로플레이트의 두번째 웰에 넣는다.

라) 세 번째, 네 번째 웰에 검체희석용액을 1방울(25㎕)씩 넣는다.

마) 두 번째 웰에서 1방울(25㎕)을 취하여 세 번째 웰에 넣고 파이펫 플랜저로 혼합한 다음 다시 세 번째 웰에서 1방울(25㎕)을 취하여 네 번째 웰에 넣고 혼합한다 (단계 희석)

바) 이하는 4. 검사 과정의 표1과 동일하게 검사하여 결과를 판독한다.

1) 미감작입자와 검체가 음성으로 반응하는 것을 확인한다.

2) 검체희석용액과 감작입자 및 미감작입자가 음성으로 반응하는 것을 확인한다.

3) 양성대조액의 역가는 HIV-1감작입자는 1:128±1, HIV-2 감작입자는 1:256±1이 되는지를 확인한다. 시험법은 아래의 표와 같이 단계희석하여 판독한다.

표2. 양성대조액 역가시험법요약